生物知识 SDS-PAGE凝胶电泳及蛋白印记 ①10×Running Buffer 将144g Glycine、30.2g Tris Base、10g SDS溶解于1L双蒸水中。 使用时稀释10倍 ②1×Tra... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 双向电泳的实验相关试剂配制 1. Bradford 工作液 95%乙醇 25ml 先用乙醇溶解考马斯亮兰G250,溶解完后再加磷 85%磷酸 52ml 酸,最后超纯水定容至500ml。过滤后置... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 电泳迁移实验 EMSA 1 、核蛋白的提取①用 细 胞 刮子刮取RAW264.7 细胞与VSMC ,移入2.5mlEP 管中。②将细胞用冰冷PBS 洗两遍,于4 ℃ , 5000g 离心3... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 【实验目的】熟悉蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理,掌握蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作方法,了解SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用范围。【实验原理】蛋... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 免疫电泳技术 一、基本概况(一)原理:蛋白质是一种两性电解质,它同时具有游离氨基和羧基。每种蛋白质都有它自己的等电点。等电点的高低取决于蛋白质的性质,在等电点时,蛋白质所带的正负... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 梯度凝胶电泳 梯度凝胶电泳也通常采用聚丙烯酰胺凝胶,但不是在单一浓度(孔径)的凝胶上进行,而是形成梯度凝胶。从凝胶顶部到底部丙烯酰胺的浓度呈梯度变化,如通常顶部凝胶浓度为5%,底... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 变性梯度凝胶电泳(DGGE) 一、实验原理变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 Electrophoretic Mobility Shift Assay–电泳迁移率检测 凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,最初用于研... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体有以下优点:①电泳后区带界限清晰;②通电时间较短(二十分钟至一小时);③它对各种蛋白质(包括血... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 胶体电泳法方法步骤 SDS 平板胶片铸造︰1) 整理出两组玻璃片及白板铸胶组合,先用酒精拭净,并选择合适的间隔条(0.75 mm) 组合起来。请熟悉铸胶三明治组合的正确组装方式,以免灌... 05月09日 发表评论 阅读全文