024年5月29日，来自厦门大学Liang Liu团队在《自然—生物技术》杂志上发表了标题为“Trans-nuclease activity of Cas9 activated by DNA or RNA target binding.”的研究成果，研究提出DNA或RNA靶标结合能激活Cas9的反式核酸酶活性。
据介绍，V型和VI型CRISPR–Cas系统已被证明能反式切割非特异性单链DNA（ssDNA）或单链RNA（ssRNA），但在使用单引导RNA的II型CRISPR-Cas系统中尚未观察到这一点。
研究人员表明，由CRISPR RNA和反式激活的CRISPR-RNA双RNA引导的II型CRISPR–Cas9系统，对ssDNA和ssRNA底物都显示出RuvC结构域依赖性的反式切割活性。Cas9对反式切割底物具有序列偏好，更倾向于切割富含T或C的ssDNA底物。研究人员发现，Cas9的反式切割活性可以被靶ssDNA、双链DNA和ssRNA激活。Cas9与引导RNA和靶RNA复合的晶体结构为靶RNA结合激活Cas9提供了结构基础。
总之，基于Cas9的反式切割活性和核酸扩增技术，研究人员开发了DNA激活Cas9检测和RNA激活Cas9检测的核酸检测平台，能够对DNA和RNA样品进行高灵敏度和特异性的检测。
文章来源：
Chen, Jiyun, Chen, Ying, Huang et al, Trans-nuclease activity of Cas9 activated by DNA or RNA target binding.DOI: 10.1038/s41587-024-02255-7,Nature Biotechnology：最新IF：68.164
