PAR 稳态受 PAR 聚合酶 (PARP) 和 PARG(聚(ADP-核糖)糖水解酶)家族的调节,以响应细胞应激条件。ADP 核糖基化是将 ADP-核糖添加到蛋白质中,是主要参与 DNA 损伤反应 (DDR) 通路的蛋白质的可逆翻译后修饰。Poly-ADP-ribosylation(称为 PARylation)是 ADP-核糖的线性或支链的添加。PARP 和 PARG 活性与炎症、缺血、中风和癌症中的细胞反应有关。PARP 抑制剂已成功用于癌症治疗,当同源重组修复 (HRR) 已经存在缺陷时,会导致合成致死。PARG 在乳腺癌中过表达,并与肿瘤生长和存活相关。PARG 活性的降低可以增强当前癌症疗法(如化疗和放疗)的效果,使选择性抑制剂抑制 PARG 成为癌症和免疫疗法中一种很有前途的方法。对 PARP 和 PARG 的进一步研究将阐明 PARylated 蛋白的水平如何导致疾病,并可以被调节以提供治疗益处。
LysA? 通用 PARylation 检测试剂盒是一种基于 ELISA 的夹心试剂盒,旨在测量和定量细胞提取物中存在的聚 ADP-核糖基化总量。该试剂盒采用方便的 96 孔规格,包含所需的所有试剂,包括 PAR 标准品,可用于建立定量测量的标准曲线。它含有足够的抗体、封闭缓冲液和检测试剂,可在 96 孔板规格中测量细胞提取物中的 PARylation 水平。它还包括细胞裂解物作为检测性能的对照。
注意:该测定仅适用于 Poly-ADP-核糖基化检测。该检测在 100 pM 至 20 nM PARylation 范围内呈线性。
图 1:LysA? 通用 PARylation 检测工作流程图。
使用抗 PAR 抗体包被 96 孔板。将细胞裂解物添加到包被孔中,因此细胞裂解物中存在的 PAR(PARylated proteins)被抗体捕获。随后与抗 PAR 一抗和 HRP 标记的二抗孵育。添加化学发光 HRP 底物可提供发光信号,该信号与细胞提取物中存在的 PAR 量直接相关
PK对比 | |||
品牌 | BPS bioscience | R&D | Cell Biolabs |
货号 | #82123 | #4520B-096-K | #XDN-5114 |
名称 | LysA™ Universal PARylation Assay Kit | HT PARP in vivo Pharmacodynamic ELISA Kit II | Poly (ADP-Ribose) ELISA Kit |
检测范围 | 100 pM to 20 nM PARylation | 10 pM-1 nM PARylation | 20 pM -10 nM PARylation |
反应次数 | 100 | 100 | 96 |
介绍 | 用于测量和量化细胞提取物中存在的聚腺苷基化总量及PARP活性 | 根据 PAR 水平监测细胞内的体内 PARP 活性 | 测定和定量细胞或组织样品中的 PAR 水平 |
细胞系验证 | HEK-293、MCF7 MDA-MB-231、Hela |
1种 | 1种 |
IC50数据 | 提供 | 不提供 | 不提供 |
抑制剂测定 | 3种抑制剂的剂量-反应曲线及详细数据 | 不提供剂量-反应曲线 | 不提供剂量-反应曲线 |
细胞裂解物对照 | 包含 | 包含 | 不包含 |
稳定性 | 按要求保存6个月内活性稳定 | 按要求保存3个月活性稳定 | 按要求保存6个月活性稳定 |
配套产品 | 大量的PARP蛋白试剂盒 | 少量 | 少量 |
价格 | ¥16170 | ¥18009 | / |
PAR 标准曲线示例 |
PARG 抑制剂PDD00017273对各种细胞系中细胞PARylation 水平的影响 |
BPS bioscience总部坐落于美国圣地亚哥生命科学研究机构和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶及其抑制剂的筛选试剂盒。BPS公司为药物研发用重组酶类的提供了重要的选择。