抗荧光淬灭剂：IF实验新宠

免疫荧光技术（IF）是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检测组织或细胞内的相应抗原（或抗体）的一门技术。

二、IF实验问题多？

理想的IF实验结果:

• 样品的组织结构完整
• 图像清晰、分辨率高
• 荧光信号强、稳定
• 无非特异性染色
• 低背景

可是理想很丰满，现实很骨感

 背景深，可能原因：

1. 封闭不充分。没有封闭非特异性结合或封闭不充分，可使用二抗来源动物的非免疫血清进行封闭，改善封闭条件；
2. 抗体浓度过高。一抗及二抗的浓度过高，建立浓度梯度预实验，在单染的体系里找到最佳抗体浓度；
3. 洗涤不充分。在洗涤缓冲液中加入0.2% Tween 20进行充分洗涤；
4. 细胞培养过于密集。若为细胞样本，优化细胞生长条件，找到最佳接种密度。

没有信号，可能原因：

1. 目的蛋白未表达。靶细胞中没有目标蛋白，建议做阳性对照，制备细胞裂解液，用Western Blotting验证目标蛋白在细胞中是否表达；
2. 细胞通透性差。蛋白位于细胞质或者细胞核内，抗体不能穿透质、核膜，在封闭液和抗体稀释液中加入通透剂或增加通透剂作用时间或浓度，不行改用其它通透剂；
3. 抗体浓度低。没有足够的一抗与目标蛋白结合，延长孵育时间，增加抗体浓度；
4. 抗原表位被固定剂遮蔽。固定步骤遮蔽了抗体识别表位（使用福尔马林和 多聚甲醛固定剂），缩短固定时间，更换固定剂。

荧光淬灭快，可能原因：

1. 荧光素稳定性差。光稳定性较差，选用光稳定性好的荧光素二抗；
2. 封片剂无抗淬灭作用。可选用防荧光淬灭剂封片。

基于传统的IF实验操作繁琐、耗时、试剂用品种类繁多、实验结果稳定性可靠性差的痛点，Abbkine开发出通用型免疫荧光（IF）工具箱。

抗荧光淬灭剂产品亮点：

① 操作便捷。无需操心复杂试剂，开盒即可开始实验；

② 组分齐全。提供优化的抗体稀释液和 SuperKine™ 增强型抗荧光淬灭剂，抗淬灭效果强，维持极佳的荧光强度；

③ 高质量荧光二抗。提供 Dylight 系列二抗，具有更强的荧光强度和更高的光学耐受性及特异性。

产品推荐：

Abbkine 抗荧光淬灭剂，产品优势特点：

① 兼容性高：精心优化配方可兼容多种荧光染料；

② 抗荧光淬灭强：封片后避光保存2周以上，仍可维持耀眼荧光；

③ 方便快捷：即用型无需配置，操作便捷；

④ 新颖包装：滴瓶包装设计，无需打开，挤压滴液，避免多次取用暴露污染。

图1. 抗荧光淬灭剂滴瓶包装外观

图2 . Abbkine抗荧光淬灭剂与其它品牌产品效果对比

图3. Abbkine 抗荧光淬灭剂0天与14天荧光效果对比

Abbkine IF系列试剂可免除您IF实验后顾之忧，配合使用增强型抗荧光淬灭剂让您的实验荧光更加耀眼夺目！

我们将持续更新更多IF相关技术前沿资讯，敬请期待！

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