重叠延伸PCR实验重叠延伸PCR技术（gene splicing by overlap extension PCR，简称SOEPCR）由于采用具有互补末端的引物，使...
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western-blot实验过程中常见问题及解答
常见问题解决对策两块玻璃板之间灌胶，胶总是不平玻璃没有洗干净，应该洗得很干净过硫酸铵和TEMED加量相对较多加完试剂后应摇匀 总是漏胶避免玻璃边缘（与胶条接触处）破...
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SDS-PAGE的主要应用有哪些？
SDS-PAGE原理蛋白质是两性电解质，在一定的pH条件下解离而带电荷。当溶液的pH大于蛋白质的等电点(pI)时，蛋白质本身带负电，在电场中将向正极移动；当溶液的p...
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cDNA文库构建详细步骤
cDNA文库的构建分为六个阶段：阶段1：反转录酶催化合成cDNA第一链1．在置于冰上的无菌微量离心管内混合下列试剂进行cDNA第一链的合成：poly(A)+RNA ...
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无菌操作的注意事项及常见问题
做不同的实验，操作上会有小小的不同，而且不可能每个动作都被描述，所以实验时必须注意自己的动作。通常要注意的就是每项操作时都要尽可能减少污染的可能性，所以动作要尽量减...
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PCR-SSCP实验步骤
一．样品制备1．PCR扩增并检测。根据不同的引物挑选适合的退火温度进行PCR扩增。扩增产物用2-2.5%的琼脂糖胶跑水平电泳检测，上样量3-5ul。PCR产物为10...
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去除去污剂的可行性
离子型去污剂用分子筛G25 柱子进行凝胶过滤，对于一些蛋白质来说，用低于临界微团浓度的另一种去污剂来平衡柱子。加入8 mol/L 的尿素， 然后把去污剂加到离子交换...
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抗体标记的步骤
下列步骤描述了使用Cy3作为代表性标记试剂， 用荧光succinimidy l 活性酶标记羊抗体。其他水溶性荧光标记物的使用与此类似(Mujumdar et al....
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DNA 凝胶电泳注意事项
DNA胶用来分离、确定或者纯化DNA片段。用于DNA测序反应的测序胶不在这儿讨论。每位实验室成员有不同的制胶方法。样品准备6 X 上样缓冲液： 30% (V/V) ...
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碱变性法提取质粒DNA
质粒DNA提取的方法很多，有碱变性法、羟基磷灰石柱层析法、溴化乙锭 – 氯化铯梯度超离心法等。本次实验是一种小量快速提取法。小量快速提取法也有多种，但基本原理和步骤...
