背景:
细胞凋亡(apoptosis)是一种基本生物学现象,指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。在正常活细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)位于细胞膜的内侧,而在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。
膜联蛋白V(Annexin V) 是一种分子量为35~36KDa的钙离子依赖型磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。通过荧光素或者生物素标记Annexin V即可简单快速地直接检测出细胞早期凋亡情况。 碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,而早期凋亡细胞的细胞膜是完好的,对PI有拒染性。但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能透过细胞膜而使细胞核染上。因此将Annexin V 与PI 匹配使用,就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。PI可以被488,532或546nm激光线激发,并发出红色荧光。
实验建议:
Abbkine Annexin V-AbFluor 488/PI双染细胞凋亡检测试剂盒含有Abbkine专有的AbFluor™ 488 绿色荧光染料标记的Annexin V,可通过流式细胞仪或荧光显微镜对凋亡细胞进行鉴定和定量。
Annexin V-AbFluor 488/PI双染细胞凋亡检测试剂盒组分:
•Annexin V Binding Buffer (5×)
•Annexin V-AbFluor™ 488
•Propidium Iodide (PI)
•Apoptosis Inducer A
•Apoptosis Inducer B • Annexin V- AbFluor™ 488
•Propidium Iodide (PI)
Annexin V-AbFluor 488/PI双染细胞凋亡检测试剂盒特点:
•Abbkine AbFluor™ 488 是FITC的卓越替代物,不仅荧光强度和光稳定性更好,而且不受pH的影响
•Annexin V- AbFluor™ 488: Ex/Em = 491/517 nm; PI: Ex/Em = 535/617 nm (DNA染料)
•适用于流式细胞术和荧光显微镜
保存建议:于-20℃,避光保存
运输条件:蓝冰运输
图1:用喜树碱诱导Hela细胞24小时,并用Annexin V-AbFluor染色™ 488凋亡检测试剂盒。AbFluor的组合™ 488和碘化丙啶允许区分早期凋亡细胞(Annexin V-AbFluor™ 488阳性)、晚期凋亡和/或坏死细胞(膜联蛋白V-AbFluor™ 488和碘化丙啶阳性)和活细胞(未染色)。
图2:用4种不同浓度(0、1:8000、1:4000、1:2000、1:1000)的喜树碱诱导Hela细胞24小时,并用Annexin V-AbFluor染色™ 488/PI凋亡检测试剂盒。AbFluor的组合™ 488和碘化丙啶允许区分早期凋亡细胞(Annexin V-AbFluor™ 488阳性)、晚期凋亡和/或坏死细胞(膜联蛋白V-AbFluor™ 488和碘化丙啶阳性)和活细胞(未染色)。
产品链接:https://www.abbkine.cn/w/product/detail/KTA0002/CN/s