引物合成介绍1.引物是如何合成的？目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产，无论采用什么机器合成，合成的原理...
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多年PCR经验总结
一、增加PCR的特异性1. primers design这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件（1）足够长...
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Real time PCR 实验注意事项
实验中的一些好习惯 加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均 移液枪用完之后要归到最大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性 一定要记着关水浴箱，切记切记...
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PCR技术详解
PCR技术概论 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高...
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PCR专栏
PCR目录 PCR原理 PCR反应体系与反应条件 PCR步骤 PCR检测 PCR反应特点 PCR仪器 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reacti...
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双酶切连接反应的经验谈
1、 在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近，必须注意酶切顺序。因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割。有的酶要求识别序列...
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试验用gelred代替EB，试验不理想，求助！！
问：实验室最近用gelred代替EB，我是直接把gelred稀释到6X Loading Buffer 中，2ml上样缓冲液加分别加入1微升，2微升--10微升的ge...
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PCR of Trouble shooting guide
1. 阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有：（1）模板核酸的制备。（2）引物的质量与特异性。（3）酶的质量。（4）PCR循环条件。模板：（1）模板中含有杂蛋白...
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RT中Olig（dT）15引物与随机引物？
RT实验Olig（dT）15引物合成的条带明显优于随机引物，不是随机引物的效果较好吗？怎样解释这种现象网友一回答：Olig（dT）适合于长链甚至全长mRNA的RT，...
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PCR扩增产物的RFLP分析
一、PCR产物用各种限制性核酸内切酶酶解 将PCR扩增产物分装，并用下列不同的限制性核酸内切酶酶切 DR1 ：Ava II，Pst I DR2 ： Fok I，Sa...
