生物知识 用于基因芯片分析的细胞RNA的抽提 一、实验试剂:Trizol试剂(Invitrogen公司),PBS缓冲液;二、具体过程:1、细胞培养结束后,若是贴壁细胞,可以用移液器吸去培养基,并加入3ml左右的... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 mRNA的分离与纯化 真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7 G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 植物基因分离的定位克隆技术 定位克隆(positoinal cloning),又称图位克隆(map-based clonig),1986年首先由剑桥大学的Alan Coulson提出。用该方法... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 核酸的抽提—mRNA的分离技巧 与rRNA 和tRNA 不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA 在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA Extraction–RNA提取 All solutions used in RNA preparation should be treated with DEPC as follows: add ... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 热酚法抽提酵母总RNA的方法 1. 将酵母细胞培养在3ml选择性培养基中,30℃过夜旋转培养。2. 稀释过夜培养的菌液,重新在10ml培养基中培养细胞。3. OD600达到1.0时,收菌,400... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 利用百泰克试剂盒保存全血样本的RNA 在用血液标本进行表达 谱芯片实验时,需要把血液中有核细胞的RNA提取出来;传统的提取RNA方法是把先把有核细胞从全血中分离出来,需要加白细胞分离液、离心等步骤,比较... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 植物组织mRNA提取 由于mRNA末端含有多poly(A)+,当总RNA流径oligo(dT)纤维素时,在高盐缓冲液作用下,mRNA被特异的吸附在oligo(dT)纤维素柱上,在低盐浓度... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 Preparation of total cellular RNA–提取总RNA方法 1) Harvest 1x105 to 108 cells. Wash 1x w/PBS and freeze in liquid N2 and store @ -... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 哺乳动物细胞总RNA的分离 这一从培养的单层哺乳动物细胞中分离RNA的实验程序系为Favaloro 等(1980)所介绍程序的改良。该程序同样适用于从悬浮培养的哺乳动物细胞中或从易于分散成单个... 05月12日 发表评论 阅读全文