生物知识 Restriction Digestion of DNA Restriction enzymes are expensive ($40 to $200 a vial): keep the enzymes at -20℃. ... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 NEB识别序列 下表中列出了NEB提供的所有限制性内切酶的特异性识别序列,同时列出的还有回文序列的每条互补链。比如CCTC(7/6) 和(6/7)GAGG均显示为MnlI识别序列。... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 EXO/S1 DELETION SERIES 1. Cut DNA with 5'- and 3'- overhangs, gel check, phenol-Sevag extract a... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 Partial Endonuclease Digestion Prepare a 100 µl reaction mixture containing the DNA of interest in the appropriat... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 Thermal Inactivation A simple, reversible way to a stop restriction reaction is by adding EDTA, which c... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 "Dirty" Mini Preps 1) Grow 3-5 ml over-night E. coli cultures containing your plasmid2) Spin down 1.5... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 动物组织RNA的提取 实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法 实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 总RNA的提取(Trizol法提取) 在收集到生物材料之后,最好能即可进行RNA制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,立... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA提取的基本操作步骤 RNA的提取准备试剂:氯仿,异丙醇,75%乙醇,无RNase的水或0.5%SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制) 操作步骤: 1. 匀浆处理: ① 组织... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA提取及注意事项 目的 研究基因的表达和调控时,需要从组织或细胞中分离纯化RNA。RNA质量的高低经常影响RT-PCR、cDNA库构建和Northern Blot等分子生物学实验的... 05月12日 发表评论 阅读全文