生物知识 限制酶在各种NEBuffer 中的活性(NEBuffer Activity Chart for Restriction Enzymes) 限制酶在各种NEBuffer 中的活性(NEBuffer Activity Chart for Restriction Enzymes)对应每一种限制性内切酶,Ne... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 酶切反应建议 一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 核酸分子杂交(二) 分子杂交(简称杂交,hybridization)是核酸研究中一项最基本的实验技术。其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 DpnI mediated site-directed Mutagenesis 1. DNADNA template plasmid 5-20 ng 10x pfu DNA polymerase buffer 5.0 µl 25uM o... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 Dam、Dcm和CpG甲基化 Dam (GmATC)、Dcm (CmCWGG) 和 CpG (mCG) 甲基化 收藏DNA甲基转移酶(MTases)普遍存在于原核和真核生物中,能将S-腺苷甲硫氨... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 DNA平端连接注意事项 T4噬菌体DNA连接酶不同于大肠杆菌DNA连接酶,它可以催化平端DNA片段的连接(Sgaramella和Khorana,1972;Sgaramella和Ehrlic... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 CIP Treatment 1. set up the following reaction:CIP RxnH 2 O7.8 ml10x cip rxn buffer2.0 mlDNA (e.... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 酶切反应(Setting Up a Restriction Endonuclease Reaction) 一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 Random Primer DNA Labeling For use with GibcoBRL Random Primer DNA labeling system.Objective:To produce radio... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 E. coli K-12限制外源DNA E.coli有几种机制可以辨别并破坏外源DNA。但这也成为克隆实验的重要问题,因为其导致了所要序列的回收量大大减少。这一问题可以使用通过突变关掉这些机制的菌株来避免... 05月12日 发表评论 阅读全文