一．原理PCR产物一般都含有过量的引物、Taq DNA酶及dNTP，这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程，因此有必要除去。目前核酸纯化的...
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提高RT-PCR的灵敏度与产物长度
材料和方法1. Eppendorf cMaster RTplusPCR系统2. Eppendorf Perfect RNA Eukaryotic试剂盒3. 所有的P...
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PCR技术：PCR产物测序
PCR技术代替了为测序而反复进行的分子克隆和模板制备步骤。PCR技术与自动测 序技术相结合后，它将成为一种最快、最有效的测定核苷权序列的方法。本章主要综 述各种测模...
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如何提高PCR产物克隆的效率
把PCR产物克隆到载体上常见有3种做法：1. 直接克隆到T载体（或者U载体上）2. 引物设计时引入酶切位点，PCR产物酶切后直接克隆到目标载体上3. 将平末端PCR...
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PCR产物的电泳检测
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。常见问题如下： 一、假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有...
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PCR产物常规纯化方法
大批量、廉价、用于测序的PCR产物纯化方法--PEG沉淀 最近，摸索了一下PEG沉淀PCR产物的方法，贴出来，与大家共享。 目的 ：探索一种方法，能将PCR产物大批...
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直接从PCR产物回收纯化DNA (Promega 公司试剂盒)
1)直接加90-100μl纯化缓冲液于1.5ml离心管，再加入30～300μl PCR反应物，Vortex混合； 2)加入1ml树脂轻轻Vortex 3次，每次间隔...
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分子实验方法8:聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆
第八章 聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第一节 概 述 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增...
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减少PCR产物中引物二聚体的方法
1.从引物自身着手，重新设计引物，这是最根本解决这一问题的办法。2.可能模板有问题，模板浓度过小，适当加大模板量。3.Taq酶，引物，Mg2+浓度可能过高，可降低它...
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聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆
PCR(Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤：(1) 变性(Denatur...
