生物知识 PCR技术系列:PCR产物克隆方法 平端连接通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效 率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能 在两6条DNA链的3... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR扩增产物的RFLP分析 一、PCR产物用各种限制性核酸内切酶酶解 将PCR扩增产物分装,并用下列不同的限制性核酸内切酶酶切 DR1 :Ava II,Pst I DR2 : Fok I,Sa... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR基因扩增及扩增产物的回收 为了获得大量的AKP基因,我们需要将目的基因通过PCR扩增基因剂量,方便下一步实验作基因重组。我们需要注意PCR产物的准确性和产率。特别注意引物、复性温度、TaqE... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR产物回收、纯化 一、实验目的学习使用DNA胶回收试剂盒回收、纯化琼脂糖凝胶中的DNA片段,掌握回收、纯化原理和实验操作。二、基本原理DNA片段的回收和纯化是基因工程操作中的一项重要... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR产物的直接纯化 一.原理 PCR产物一般都含有过量的引物、Taq DNA酶及dNTP,这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程,因此有必要除去。目前核酸纯化... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 推荐:PCR产物的直接测序 凝胶纯化PCR扩增的靶序列如果最佳PCR反应条件不能产生所需的特异性产物,可采用新的寡核苷酸重新进 行扩增,或用凝胶电泳来分离不同的PCR产物,而后再各自重新扩增进... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR技术:PCR扩增产物的电泳分析 凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种. 一、琼脂糖凝胶电泳: 琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和 鉴定核酸的方法.琼脂糖是从海藻中提... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 提高PCR 产物的几种有效方法 摘 要: 结合作者的工作实际,着重介绍了有效提高PCR 产物的几种方法:如怎样高效快速地设计PCR 引 物,怎样尽快确定PCR 反应的最适退火温度,如何提高GC 富... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 聚合酶链式反应(PCR)扩增与扩增产物克隆 概 述 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤: (1) 变性(... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 克隆PCR产物 克隆PCR扩增DNA片段至质粒或噬粒载体这一过程看似容易,实际操作较难。下面四个方案将叙述扩增DNA片段的克隆难题:1. PCR产物的平末端克隆。2. 克隆化的PC... 05月10日 发表评论 阅读全文