生物知识 提取病毒RNA方法 一、用异硫氰酸胍提取 提禽流感病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题): 1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendor... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 病毒RNA提取实验方法[protocol] 1,用异硫氰酸胍提取 提病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题): 1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管 ... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 病毒滴度的测定 稀释计数法滴度单位:TU/ml,指每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。”TU”为”transducing units”的缩写,中文为“转导单位”,表示可以感染并... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 慢病毒的浓缩与纯化 方法一 超速离心沉淀法1. 取6个Ultra-clear SW28离心管,用70%乙醇消毒后,放在超净工作台中打开紫外灯继续消毒30分钟。2. 每个Ultra-cl... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 通过重组逆转录病毒(慢病毒)载体感染制备转基因动物 简介慢病毒载体是近几年发展起来的新型转基因载体。慢病毒属逆转录病毒的亚科,慢病毒载体经结构改造后,不在宿主细胞内增殖,也不会导致寄主细胞的死亡,受感染动物细胞能正常... 05月05日 发表评论 阅读全文
生物知识 高滴度反转录病毒和慢病毒载体的制备 一、试剂CaCl2溶液( 2mol/L )、完全培养基、DMEM 培养基、乙醇(或异丙醇) (70% )、胎牛血清( FBS )、HBS 溶液(2X)、HEPES ... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 慢病毒滴度的计算 实验准备目标细胞:选择适合慢病毒感染的细胞株(如 HEK293T 或靶细胞)。病毒稀释:对病毒原液进行一系列梯度稀释(如 10−1,10−2,10−3,10−4)。... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 监测慢病毒载体储备液中的可复制型病毒 一、试剂完全培养基、DMEM 培养基、胎牛血清(FBS )、慢病毒载体储备液、OptiMEM-I、青霉素/链霉素( P/S ) 溶液(100×)、磷酸盐缓冲盐水( ... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 病毒包装过程中,细胞大量死亡,还有必要收集病毒吗 在病毒包装过程中,如果观察到细胞大量死亡,是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素:病毒滴度:尽管细胞大量死亡,仍然有可能产生高滴度的病毒。如... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 慢病毒包装系统介绍 一、慢病毒包装系统的特点与优势感染效率高:慢病毒能够感染多种细胞类型,包括难以转导的细胞,如神经元、心肌细胞等,实现高效基因转移。基因整合稳定:慢病毒可将外源性基因... 05月02日 发表评论 阅读全文