生物知识 悬浮细胞转染后筛选问题求助 问:大家好,我第一次作转染,是悬浮细胞,已经在园子里看了好多这方面的资料,收获很大,可还是几个问题要问大家:1)我打算用24孔板作转染,之后的筛选过程中肯定会有很多... 04月21日 发表评论 阅读全文
生物知识 关于CHO-K1细胞稳定转染和瞬转COS的问题 问:各位大虾小弟我最近一直在瞬转COS细胞分泌表达上清一直没有表达也浓缩过再做ELISA WB 都没有啊时间挺长了实在等不及了就想稳定转染cho-k1细胞系通过MS... 04月21日 发表评论 阅读全文
生物知识 同一种细胞,不同质粒转染,那G418筛选浓度都一样吗 问:跟文献上的细胞一样,但跟他的质粒不一样,文献上说G418筛选浓度为500mg/ml,那我可以直接用这个浓度筛选我转染以后的浓度吗?质粒的不同对同一细胞的G418... 04月21日 发表评论 阅读全文
生物知识 稳定转染细胞株的鉴定 问:目的蛋白7kd,筛了稳定株,可western检测不到,因为电泳时marker也跑得不好,因此不能确定是假阳性。载体上带了myc tag,不知做免疫荧光来检测是否... 04月21日 发表评论 阅读全文
生物知识 转染过程 问:哪位高手给分别指点一下脂质体和质粒转染的具体过程!答:具体过程都大至差不多,一管混匀质粒,另一管混匀脂质体,脂质体混匀后过几分钟,逐滴加入混匀的脂质体,温柔混匀... 04月21日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何提高U251的转染效率 问:手上有U251细胞,pEGFP载体,现在将不带外源基因的载体转u251的效率都很低,10%都没有。所用转染试剂:invitrogen的Lipofectamine... 04月21日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞稳定转染建系后再转染的问题 问: 细胞稳定转染建系后,转染的质粒细胞内本身有较高表达,我的质粒是点突变的质粒,我做的是稳定转染,按理论稳定建系后不应该对细胞增值有影响的。根据实验设计,我往已经... 04月21日 发表评论 阅读全文
生物知识 GFP转染后克隆筛选 问:我最近对肿瘤细胞转染GFP,其中不含有其他外源性基因。转染后短期内发现阳性细胞非常多,可是随着时间及细胞的增殖,培养孔内的细胞总数在不断的增加,但是发绿色荧光的... 04月21日 发表评论 阅读全文
生物知识 做稳定转染选择何种质粒提取试剂盒 问:我想用纸脂体转染法将质粒稳定转染入肿瘤细胞,请问可以选择哪种试剂盒? 因为我不报销费用,所以想选一种即好用又较为便宜的,请求指点。谢谢答:您的情况我们去年也曾遇... 04月21日 发表评论 阅读全文
生物知识 质体转染293细胞后,细胞漂浮死亡? 问:这几天做293细胞的脂质体转染,为腺病毒的包装阶段.用最小的培养瓶(好像是25ml的),加入脂质体10μl,pacI酶切纯化物8μg 进行转染.细胞最密处为80... 04月21日 发表评论 阅读全文