生物知识 构建全长cDNA文库:噬菌体文库和质粒文库注意事项 构建全长cDNA文库分为噬菌体文库和质粒文库,二者大同小异。无论怎样,应当注意如下几个方面: 一、保证获得数量足够的高质量的起始RNA。 构建cDNA文库要求的RN... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 原位杂交操作方法 (一)、仪器设备 医用微波炉; 水浴锅。 (二)、试剂 0.2mol/L HCl:HCl 8.2ml,H20 定容0.5L。0.1mol/L三乙醇胺(pH8.0):... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA Collection 实验概要 Provides an easy and fast method for isolating total RNA from fibrous tissues... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞组分的分析方法――核酸序列的原位杂交 一.基本原理 核酸分子杂交技术是目前分子生生物学、细胞生物学和生物化学研究中应用最广泛的技术之一,是定性、定量和定位检测两条来源不同的聚核苷酸链上碱基顺序同源性的... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 提取病毒RNA方法 一、用异硫氰酸胍提取 提禽流感病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题): 1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendor... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 cDNA synthesis using superscript II ATTENTION: This is expensive. One reaction as described here is ca. 6 Euro! Check ... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 Sauer:RNA Purification from E. coli My Experience Purifying RNA from E. coliRegarding RNA extraction, there is a horri... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 真核细胞总RNA的制备 从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚(dT)纤维素选择分离mRNA,cDNA合成及体外翻译等实验的... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 用普通的提取法从组织中提取RNA 1.1 匀浆 1) 每个无菌的2 ml圆底离心管中加入1ml TRIZOL试剂,每个大鼠的腺垂体从-80°C取出后立即于预冷的TRIZOL试剂里用POLYTRON组... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 植物RNA的分离 1. 总RNA的分离 总RNA分离的方法很多,常采用的是异硫氰酸胍和b-巯基乙醇这两种RNase抑制剂来抑制RNase的活性,同时,异硫氰酸胍与十二烷基肌氨酸钠(s... 05月11日 发表评论 阅读全文