生物知识 RNA提取心得 一、组织RNA提取1. 最好新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好,这是肯定的。2. 如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80°或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 苯酚法提取酵母RNA (一)原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此,提取RNA时要把RNA与蛋白质分离并除去。将细胞置于含有十二烷基磺酸钠(Sodium ... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 蓝白斑筛选假阴性 质粒除有抗性基因外,往往还带有其他明显的筛选标记,最常用的是蓝白斑筛选( -半乳糖苷酶系统)。此类载体携带lacZ’基因,它编码β-半乳糖苷酶的N-末端(α-肽),... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞总RNA的提取 1. 六孔板每孔细胞中加入1ml Trizol,冰上放置5min,枪头吹打。2. 将各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中,加入氯仿0.2ml/管,用力振摇15s。1... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 肝脏细胞RNA的提取 一.原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 提取植物组织RNA的要点 从植物组织中提取RNA是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析,纯化mRNA以用于体外翻译或建立cDNA文库,RT-PCR及差示分析等... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 Fractionation of Nuclear and Cytoplasmic RNA by Trizol–分别提取细胞核和细胞质RNA T℃OS-M6 cells grow in 6-well plates, 2ml media totalT℃V1PD cells grow in 100mm pla... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何确定RNA质量的经验谈 1)检测RNA 溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的,我们只看OD260/O... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 外源DNA片段和线状质粒载体的连接 外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 组织和细胞RNA的制备:异硫氰酸胍法 (一)试剂准备1. CSB缓冲液:42mM柠檬酸钠;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸钠);0.2 mM β-巯基乙醇。2. ... 05月12日 发表评论 阅读全文