生物知识 免疫PCR要点与注意事项 一、免疫PCR要点(1)连接分子免疫PCR需要适当的连接分子连接报告分子和抗原抗体复合物。1 992年Sano用重组的链亲和素-蛋白A嵌合体作为连接分子,创立了免疫... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 双酶切连接反应的经验谈 1、 在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近,必须注意酶切顺序。因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割。有的酶要求识别序列... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 试验用gelred代替EB,试验不理想,求助!! 问:实验室最近用gelred代替EB,我是直接把gelred稀释到6X Loading Buffer 中,2ml上样缓冲液加分别加入1微升,2微升--10微升的ge... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR of Trouble shooting guide 1. 阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有:(1)模板核酸的制备。(2)引物的质量与特异性。(3)酶的质量。(4)PCR循环条件。模板:(1)模板中含有杂蛋白... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 RT中Olig(dT)15引物与随机引物? RT实验Olig(dT)15引物合成的条带明显优于随机引物,不是随机引物的效果较好吗?怎样解释这种现象网友一回答:Olig(dT)适合于长链甚至全长mRNA的RT,... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR扩增产物的RFLP分析 一、PCR产物用各种限制性核酸内切酶酶解 将PCR扩增产物分装,并用下列不同的限制性核酸内切酶酶切 DR1 :Ava II,Pst I DR2 : Fok I,Sa... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR扩增样本DNA的HLA基因片段 一、PCR扩增体系1. 1.0 uM 引物2. 300 ng 待测样本基因组DNA3. 2.0 U Taq多聚酶4. 200 uM 各种dNTP5. 用1×PCR缓... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 基因的PCR扩增(聚合酶链式反应) 实验原理 单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下,可以利用DNA聚合酶按5’→3’方向复制出互补DNA。这时单链DNA称为模板DNA,寡聚核苷酸片段称为引物(Pri... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 一种新颖简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法的建 一种新颖简便的荧光实时 RT-PCR相对定量方法的建立 A Novel and Convenient Relative Quantitative Method of... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 聚合酶链式反应(PCR)扩增 材料、设备及试剂 一、材料 不同来源的模板DNA。 二、设备 移液器及吸头,硅烷化的PCR小管,DNA扩增仪(PE公司),台式高速离心机。 三、... 05月11日 发表评论 阅读全文