生物知识 荧光探针与荧光染料 1.TaqMan 探针TaqMan 探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的 5’ 末端, 而淬灭剂则在 3’ 末端。当探针与靶序列配对时,荧光基团发射的荧光因... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR-DGGE操作步骤 变性梯度凝胶电泳DGGE操作步骤:1、将海绵垫固定在制胶架上,把类似‘三明治’结构的制胶板系统垂直放在海绵上方,用分布在制胶架两侧的偏心轮固定好制胶板系统,注意一定... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR扩增DNA 【实验目的】 1.掌握PCR扩增DNA的技术及原理 2.学习PCR扩增仪的使用 【实验原理】 聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PC... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 克隆长期做不出来,最大的原因是实验习惯不好! 我做不出来克隆的时间长达半年,期间克隆实验方面许多问题都遇到过,现在总结主要的一些问题和大家交流,希望大家以后不要犯我一样的错,少走弯路。1、感受态细菌本身有质粒污... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 Real Time PCR 常用试剂使用说明 简单说明:transhold染料法PCR master mixReal Time PCR反应液配制(50μl反应体系,染料法):使用准备: 引物溶解:先12000r... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 大片段DNA的PCR扩增 一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性通常所用的PCR方法都在两个方面有局限,即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcus furiosus... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR技术应用九:HIV感染 八十年代以来由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染而引起的艾滋病(AIDS)因其严重的危害性而受到人们高度重视,力争早期诊断和寻求有效治疗是防止其广泛传播的关键所在.聚合... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR技术的基本原理 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成: (1)模板DNA的... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 双酶切的一点心得 1、双酶切时如果两种酶反应温度一致而buffer不同时,可查阅内切酶供应商在目录后的附录中提供的各种酶在不同buffer中的活力表,如果有一种buffer能同时使2... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR优化策略 PCR过程中如果没有找到最佳的扩增条件将会导致产生许多不确定的、不需要的产物,有时甚至没有目的产物;而在另一个极端,又可能没有扩增到任何产物。这时改变已知对引物-模... 05月11日 发表评论 阅读全文