生物知识 MLPA方法与遗传疾病检测 MLPA(Multiples ligation-dependent probe amplification),多重连接依赖探针扩增,是一种在同一反应管内检测多达50... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 BSP/MSP:想说爱你不容易 甲基化研究做了点甲基化研究,从头下来,也有一点点体会。也看了院子里不少牛人的新的体会。本人将每一个步骤的具体操作、每个操作的具体注意事项和心得进行初步总结,慢慢叙来... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 甲基化PCR检测方法 一、基因组DNA的提取此步重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者。使用两者的细节:1. 蛋白... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 甲基化特异性PCR全程易出现的问题与控制措施 亚硫酸氢钠修饰DNA的目的是将DNA序列中未甲基化的胞嘧啶完全转化为尿嘧啶,而甲基化的5一甲基胞嘧啶保持不变。影响此过程的主要因素有修饰试剂的浓度、反应温度、反应环... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 差异性甲基化杂交(DMH) 1. 微阵列构建 (1)基因组片段化:将雄性个体(雄性个体包括完整的染色体,即含有Y染色体)基因组DNA经MseI消化(MseI识别位点为TTAA,可以保证富含Cp... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 基因组非特异性甲基化水平的研究 1. 3H―SAM掺入后液闪检测法 (1)将约2 μg 基因组与足量3H标记的SAM,甲基化酶(SssⅠ或HpaⅡ)共同温育,SAM的甲基化基团将被掺人到目的DNA... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR操作时应注意的事项 PCR检测微量感染因子时,容易因为污染的而导致各种问题,因此,进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 转基因大米中Bt基因检测 2014 年7 月,央视日前报道了湖南、湖北、安徽、福建等4省存在转基因大米的新闻,引发社会极大关注。记者在武汉市一家大型超市,随机购买5种大米。经检测后发现,这5... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 RT2 Profiler PCR Arrays新手小技巧及注意事项 以下是做了几百次PCR Array的Matt Finley博士的经验之谈:RNA纯化和分析:起始RNA样品的质量是成功实验的最重要的因素之一。我强烈推荐使用QIAG... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 Overlap PCR(重叠PCR)的基本原理 Overlap PCR(重叠PCR)重叠PCR的应用是非常广泛的,他的原理其实很简单:比如说有两个基因或者说一个启动子和一个基因,你要将他们连接到一 起,我们首先想... 05月11日 发表评论 阅读全文