生物知识 高质量RNA的标准 real time RT-qPCR 是检测样本中特定基因表达量的有效方法,包含逆转录步骤和定量PCR步骤。好的开始是成功的一半,获得高质量的、能正确反应样品中转录情... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 定量PCR常见问题及对策 Q1.无CT值(信号)出现1.反应循环数不够。一般都要在35个循环以上,可根据实验情况增加循环(如至45cycles),但高于45个循环会增加过多的背景信号。2.检... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 Real time PCR经验 从RNA的提取到PCR 一 :引物的设计引物的设计对于这个实验至关重要,因为real time pcr的检测灵敏度比较高,所以相应的对引物设计的要求就很高。普通的要求规则大家都知道,还有几... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 real time PCRTaqman探针设计、实时多重PCR探针的选择、引物的设计及评价 一、实时荧光Taqman 探针设计总原则:探针选择要保守,引物选择要保守,因此必须找一段100-200bp相对要保守的片段来设计引物与探针。即real-time P... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 实时荧光定量PCR的研究进展及其应用 多聚集链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术多聚集链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术发明至今... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 实时定量PCR的原理、探测化学物质及探针优化(一) 1. 实时PCR原理对扩增产物进行可重复性的定量长期以来一直是科学家和研究者的目标。传统的方法需要对终产物进行凝胶电泳分析。这种方法可以确定目的产物和竞争产物的大小... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 Protocol for Real-Time RT-PCR This protocol describes the detailed experimental procedure for real-time RT-PCR u... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 利用Thermo Scientific的Solaris qPCR产品进行实时定量PCR实验 我们将演示如何使用GENEius试剂产品搜索功能在网站(www.thermo.com / Solaris)上订购合适的Solaris试剂,以及如何用Solaris试... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 实时定量PCR的原理、探测化学物质及探针优化(二) 1)为了在SG反应后作溶解曲线,引入与溶解曲线起始温度点相同的保温步骤(大约60秒),这样可以确保溶解温度起始于一个确定的温度。2)溶解曲线分析可以重复。可以在相当... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 real -time PCR体系的优化 实时定量PCR以其精确、快速、方便,越来越多的应用在科研、临床及检验检疫的各个领域。但是定量PCR是对精确性要求很高的实验,实验的条件对实验结果的影响非常大。在此谈... 05月11日 发表评论 阅读全文