真菌几丁质酶和蛋白酶检测

问:很多生物防治用的真菌可以产生几丁质酶和蛋白酶等代谢产物,现在实验想检测这两种酶的活性的大小,不知道用那种方法,请教各位!有没有简单的方法如平板法,测代谢产物法等,具体方法如何?

答:可以用透明圈法,具体做法就是提出几丁质粗酶液后在几丁质—PDA培养基上打孔培养一定时间然后观察透明圈的大小,测代谢产物应该是不行,因为几丁质酶分内外切酶,产物不一,测不出来的,你也可以用聚丙烯酰胺电泳检测。具体方法可以参考这篇文章Chitinase system of Bacillus circulans WL-12 and importance of chitinase A1 in chitin degradation 。

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