倒去培养基，先加入PBS1ml，再加入0.25％胰酶1ml，轻轻晃动培养瓶，使之分布均匀；约10秒。
将培养瓶迅速转至镜下观察，镜下见细胞触角变钝，细胞变圆，将瓶侧立回到无菌台内，到掉胰酶，加入2mlDMEM培养基（内涵20%胎牛血清），终止消化，弯管吹打成单细胞，可再在镜下观察，确定是否吹打完全。
按1：3或1：2传代，加入适量新鲜培养基后，1.5-2.0ml。放入CO2培养箱。
注意：时间宁短勿长。宁愿消化不足也不能消化过，PDLC细胞不能等到细胞长融合再传代，长到80％左右就可以传代了，否则细胞易老化。
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