压滴法

一、简介

鞭毛是细菌的运动器官,细菌是否具有鞭毛,以及鞭毛着生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。一般细菌的鞭毛只能用电子显微镜观察,进行鞭毛染色后可用普通光学显微镜观察。细菌运动性的观察可用压滴法和悬清法。观察时,要适当减弱光强度以增加反差,若光线太强。细菌和周围的液体难以区分。

二、操作方法

压滴法

三、原理

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四、材料与仪器

苏云金芽孢杆菌 假单胞菌 金黄色葡萄球菌硝酸银鞭毛染色液 Leifson 氏鞭毛染色液 0.01% 美蓝水溶液载玻片 盖玻片 凹载玻片 无菌水 凡士林 显微镜

五、步骤

玻片的准备、菌种材料的准备同鞭毛染色实验。

1. 制片

在洁净载玻片上加一清无菌水,挑取一环菌液与水混合,再加一环 0.01% 的美蓝水溶液与其混合均匀。用镊子取一洁净盖玻片,使其一边与菌液边缘接触,然后将盖玻片慢慢放下盖在菌液上。观察专性好氧菌时,可在放盖玻片时压入小气泡,以防止细菌因缺氧而停止运动。

2. 镜检

先用低倍镜找到标本,再用高倍镜观察。也可用油镜观察,用油镜时,盖玻片厚度不能超过 0.17 mm。观察时,要用略暗光线。

有鞭毛细菌可作直线、波浪式或翻滚运动,两个细菌之间出现明显的位移而与布朗运动或随水流动相区别。

六、注意事项

1. 观察专性好氧菌时,可在放盖玻片时压入小气泡,以防止细菌因缺氧而停止运动。

2. 用油镜时,盖玻片厚度不能超过 0.17 mm。观察时,要用略暗光线。

七、常见问题

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