新型PCR分析方法毛细管PCR技术

常规PCR反应采用导热性较差的塑料管作为反应容器,对于100~1样品,样品温度要比槽板温度滞后20—30s,加上槽板升降温度较慢(1’C/s),因此30个循环反应通常需要2~6h,循环时间多浪费在加热和冷却样品过程中,不能满足临床快速诊断的需要。 毛细管PCR由于采用导热性远强于塑料管的毛细管作为反应容器,使得样品温度滞后时间小于1s,对于扩增500bp的片段,延伸反应10s就可完成;对于10/A1的样品,变性和复性均能在1s内完成;另外,毛细管PCR仪采用高速空气流作为加热和冷却的介质,保证了温度的均一性、温度的迅速变化及样品和空气间的快速热传导,使得样品温度变化率可达5~10~C/s,因此毛细管PCR仪能够在短至15min内完成30个循环。而仪器方面则出现了相应的附件用于承载装有样品的毛细管。 目前,PCR的发展主要集中在扩增条件的完善、扩增产物检测方法的改进和扩增产物由定性分析向定量分析转变上。

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