新生儿胆红素脑病动物模型的建立

简介

新生儿发生严重高胆红素血症时,脂溶性的未结合胆红素通过血脑屏障,沉积于基底神经核、丘脑、小脑、延髓、大脑皮质、脊髓等部位,进入神经细胞,使其变性、死亡,以致脑损伤,即胆红素脑病。因此,经小脑延髓池注射使胆红素直接进入脑脊液循环,在中枢神经系统沉积,导致脑损伤。

原理

经小脑延髓池注射使胆红素直接进入脑脊液循环,在中枢神经系统沉积,导致脑损伤,即胆红素脑病。

用途

该方法受血脑屏障功能状态的影响较小,可更直接地用于胆红索神经毒性的研究。

材料与仪器

器材:

注射器、针头。

试剂:

①胆红素;

②盐酸;

③氢氧化钠

④乙醚;

⑤酒精。

步骤

新生儿胆红素脑病动物模型建立的基本过程可分如下几步:

A、避光称取晶体胆红素 5 mg 溶于 50 μl 的 0.5mol/L 氢氧化钠中,加入双蒸水 450 μl,0.5mol/L 盐酸调节 pH 至 8.5。

B、SD 孕鼠足月自然分娩,母鼠喂养至第 7 天。新生鼠称重后, 吸入乙醚麻醉后俯卧,消毒颈后并使之拱起使用注射器,从枕外粗隆和颈椎最高点之间的中点进针,向两耳连线中点方向穿刺,当穿破寰枕筋膜有突破感时,回抽有少量脑脊液,即穿刺成功。

C、经小脑延髓池注射胆红索 2 μ/g,观察其神经行为改变。

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