无菌小鼠代乳及代孕技术-无菌小鼠代乳技术

简介

无菌小鼠代乳技术,是用已有的无菌小鼠对剖宫产获得的目的小鼠进行代乳的方法。

材料与仪器

器材:

安装灭菌好的小鼠饲养隔离器、与隔离器接口兼容的转移箱、无菌饲料、垫料、水、手术隔离器。

试剂:

①50 mg/mL Luteolil Vet (CeVa, Holland)0.1 mL, 室温保存;

②1% 的过氧乙酸溶液,室温保存。

步骤

无菌小鼠代乳技术的基本过程可分为如下几步:

A. 确保隔离器内饲养的无菌代乳鼠 (germfree surrogate mother), 本实验室使用昆明小鼠作为代乳鼠,目的小鼠(需要无菌化的品系)怀孕 19 日时分挽不超过 5 天。

B. 第 0 天:交配目的小鼠;

C. 第 1 天:检查目的小鼠阴道栓,确保目的小鼠交配成果;

D. 第 18 天:仔细检查饲养隔离器内物品,灭菌、传递所需物品至饲养代乳鼠的隔离器内。灭菌手术隔离器,准备全子宫切除术所需手术器械至手术隔离器内,通风过夜。

E. 第 20 天:全子宫切除无菌剖宫产,将目的小鼠的仔鼠与代乳鼠的仔鼠混合,代乳,在代乳后 24 小时后查看代乳情况,代乳 3 周后对隔离器、小鼠进行无菌检测,判断代乳是否成功。

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