中性蛋白酶（Dispase）是一种无哺乳动物源（AOF）的金属中性蛋白酶，采用沃辛顿公司研发的方法进行纯化。其温和的蛋白水解作用使该酶特别适合用于原代细胞和传代（继代培养）细胞培养的制备，因为它对细胞膜较为温和。这种蛋白酶还可作为细胞分离和组织解离应用中的辅助酶，通常与胶原酶一起使用。
产品核心特性：
·来源：细菌 Bacillus polymyxa，切割纤维连接蛋白（Fibronectin）和 IV 型胶原，温和解离细胞间连接。
·适用场景：所有规格通用，包括心脏组织消化、神经细胞分离、肿瘤微环境分析和内皮/上皮细胞分离。
·优势： 活性不受血清抑制，对细胞损伤小，适合活细胞实验（如 scRNA-seq、流式细胞术）；不含动物源性成分，符合临床前研究标准。
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心脏组织消化 与胶原酶 IV 和 DNase I 联用，用于心肌细胞和血管内皮细胞分离 |
神经细胞分离 背根神经节（DRG）、中枢神经元或小胶质细胞解离 |
肿瘤微环境分析 实体瘤组织消化（与胶原酶/DNase I 联用） |
三款货号的差异（仅包装规格不同）
| 货号 | 包装量 | 储存形式 | 适用实验规模 |
| LS02100 | 1 克 | 冻干粉 | 小规模实验（单次或少量样本） |
| LS02104 | 5 克 | 冻干粉 | 中规模研究（多次实验或高通量筛选） |
| LS02106 | 25 克 | 冻干粉 | 大规模生产或长期需求（工业级） |
典型应用方法（所有规格通用）
1. 心脏组织解离：
·浓度：1.2 U/mL（或 100 μg/mL）
·缓冲液：含 Ca??/Mg??的 DPBS
·联用酶：胶原酶 IV（LS004186） + DNase I（LS002007）
·条件：37°C 消化 40-45 分钟。
2. 神经组织解离：
·浓度：0.7 U/mL（或 50-100 μg/mL）
·联用酶：胶原酶 + DNase I（DRG） 或 木瓜蛋白酶（脑/脊髓组织）
·条件：37°C 或低温 25°C（神经元保护）。
3. 肿瘤组织解离：
·浓度：0.5-2.0 mg/mL（依组织硬度调整）
·联用酶：胶原酶（LS004154） + DNase I
·条件：37°C 消化 30-60 分钟。
根据组织类型调整浓度：
·高硬度组织（如实体瘤、成体心脏）：1-2 mg/mL。
·脆弱组织（如胚胎组织、神经元）：0.5-1 mg/mL。
其它产品信息：
| 特性 | 详情 |
| 分子量 | 36 千道尔顿（kDa） |
| 最适 pH | 在较宽 pH 范围（4.0-9.0）内稳定，最适 pH 为 5.9-7.0 |
| 稳定性 / 储存条件 | 2-8°C 下可稳定保存 12 个月；用水或常用平衡盐溶液 / 培养基复溶后需分装并冻存于 - 20°C |
| 特异性 | 非特异性切割含有亮氨酸（Leu）和苯丙氨酸（Phe）的肽键 |
| 激活剂 | 二价阳离子（如 Ca2+、Mg2+、Mn2+、Fe2+） |
| 抑制剂 | EDTA（1mM）、EGTA、1-10 - 邻菲罗啉及重金属离子 |
| 应用 | 常用于分离表皮与真皮（保留完整上皮层）、干细胞、肝细胞及其他细胞的分离； 由于涉及变量多样性，具体分离条件需针对每种细胞 / 组织通过实验确定 |
参考文献：
1. PDFM. Corrales, Benjamin T. Cocanougher et al. “A single-cell transcriptomic atlas of complete insect nervous systems across multiple life stages.” Neural Development[2022-08-24]
2. U. Laemmli. “Cleavage of Structural Proteins during the Assembly of the Head of Bacteriophage T4.” Nature[1970-08-15]
3. PDFO. H. Lowry, N. J. Rosebrough et al. “Protein measurement with the Folin phenol reagent..” The Journal of biological chemistry[1951-11-01]
4. PDFBenjamin T. Cocanougher, J. Wittenbach et al. “Comparative single-cell transcriptomics of complete insect nervous systems.” bioRxiv[2019-09-30]
5. PDFSelina M Garcia, J. Naik et al. “Acid-sensing ion channel 1a activates IKCa/SKCa channels and contributes to endothelium-dependent dilation.” The Journal of General Physiology[2022-12-09]
6. PDFEdgar Creus-Bachiller, J. Fernández-Rodríguez et al. “Expanding a precision medicine platform for malignant peripheral nerve sheath tumors: New patient‐derived orthotopic xenografts, cell lines and tumor entities.” Molecular Oncology[2023-10-05]
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