微孔滤膜过滤除菌实验

一、简介

过滤除菌是通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法。根据不同的需要选用不同的滤器 和滤板材料。此法除菌的最大优点是可以不破坏溶液中各种物质的化学成分,但由于滤量有限,所以一般只适用于实验室中小量溶液的过滤除菌,较大量溶液的滤菌装置,如水的细菌学检査,见滤膜法测定水中大肠菌群实验。

二、操作方法

微孔滤膜过滤除菌实验

三、原理

微孔滤膜过滤器是由上下二个分别具有出口和入口连接装置的塑料盖盒組成,出口处可连接针头,入口处可连接针筒,使用时将滤膜装入两塑料盖盒之间,旋紧盖盒,当溶液从针筒注入滤器时,此滤器将各种微生物阻留在微孔滤膜上面,从而达到除菌的目的。根据待除菌溶液量的多少,可选用不同大小的滤器。

四、材料与仪器

肉汤蛋白胨平板2% 的葡萄糖溶液注射器 微孔滤膜过滤器 0.22μm 滤膜 无菌试管 镊子 玻璃刮棒

步骤

1. 组装、灭菌

将 0.22 μm 孔径的滤膜装入清洗干净的塑料滤器中,旋紧压平,包装灭菌后待用(0.1 MPa, 121.5℃ 灭菌 20 min)。

2. 连接

将灭菌滤器的入口在无菌条件下,以无菌操作方式连接于装有待滤溶液(2% 葡萄糖溶液)的注射器上,将针头与出口处连接并插入带橡皮塞的无菌试管中,见图 VI-5。

3. 压滤

将注射器中的待滤溶液加压缓缓挤入过滤到无菌试管中,滤毕,将针头拔出。

4. 无菌检査

无菌操作吸取除菌滤液 0.1 ml 于肉汤蛋白胨平板上,涂布均匀,置 37℃ 温室中培养 24 h,检査是否有菌生长。

5. 清洗

弃去塑料滤器上的微孔滤膜,将塑料滤器清洗干净,并换上一张新的微孔滤膜,组装包扎,再经灭菌后使用。

注意事项

1. 压滤时,用力要适当,不可太猛太快,以免细菌被挤压通过滤膜。

2. 整个过程应在无菌条件下严格无菌操作,以防污染。过滤时应避免备连接处出现渗透现象。

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常见问题

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