生物知识 如何判断细胞是否被污染? 发生污染,既耽误时间又是一个灾难,熟练的无菌操作能避免许多问题,但早期检测污染是一种可以预警的方法。对于培养箱中的每瓶细胞都要注意观察,要养成习惯,每次打开培养箱时... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 病毒感染细胞实验整体流程 目的基因不能直接整合到大多数真核细胞,常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞,从而得到表达满足实验需求。病毒有很多种,常见的有慢病毒和腺病毒。关于慢病毒和腺病毒... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 影响RNA转染的因素 转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞DNA转染效率影响因素 1.组织培养试剂优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DME... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染实验方法有哪些? 1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 电转染实验,如何设置正确的siRNA实验对照组? 1.设置空白对照组,检验细胞生长状态。2.设置阴性对照组,无血清培养基 + Entranster-E 电转染试剂 + 阴性siRNA。3.设置阳性对照组,无血清培养... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何上调或下调特定的miRNA? miRNA通过与转录本的相互作用,关闭或抑制基因的表达。最近的研究表明它们影响了约三成的基因。miRNA在多个组织中差异表达,这就让表达图谱分析成为研究的重点。同时... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 常用的细胞株 持续传代的细胞株有更高的生长速率、克隆效率、成瘤率和更多的染色体组型。持续传代细胞株经常被改造成所需的独特表型。细胞株分化度越高,它的生长也就越慢。常用的细胞株细胞... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染效率重复性差的原因是什么? 转染效率重复性差:1. 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。2.细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。3.细胞传代次数... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染实验易出现的问题 1.准备不足做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。2.... 05月03日 发表评论 阅读全文