生物知识 shRNA转染实验步骤 下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下shRNA转染步骤(24孔板)1.提前1天细胞种植贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 做好RNA转染的几点建议 1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞的聚集体培养 聚集体培养(aggregate culture) 是指先将肿瘤细胞在旋转摇动培养仪上培养,使肿瘤细胞形成规则的细胞球体结构,然后再将球体进行静止培养,肿瘤细胞可自由... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何优化RNA转染条件? 可从以下几方面进行优化:1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞转染效率低的原因及解决方案 细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题,尤其是原代细胞转染,转染难度更大。现分享几个细胞转染实验常见的几个陷... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 慢病毒转染贴壁细胞实验方法 1.提前一天细胞铺板提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。感染实验⑴将EnvirusTM-LV用无血... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 PBMC细胞可以用电转染吗 PBMC细胞(外周血单个核细胞)可以通过电转染(electroporation)进行基因转染。然而,由于PBMC细胞包括T细胞、B细胞、单核细胞和NK细胞等多种类型... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 影响RNA转染实验的因素有哪些? 1. 转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何能够做好siRNA转染实验? 1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 人胚眙肝细胞的培养 随着各型肝炎、肝硬化、肝癌等慢性肝病的发病率日益升高,体外培养的肝细胞也被广泛地用千肝病基础研究中。尽管细胞培养技术不断改进和成熟,国内外也先后建立了多株人肝癌细胞... 05月03日 发表评论 阅读全文