生物知识 western-blot实验过程中常见问题及解答 常见问题解决对策两块玻璃板之间灌胶,胶总是不平玻璃没有洗干净,应该洗得很干净过硫酸铵和TEMED加量相对较多加完试剂后应摇匀 总是漏胶避免玻璃边缘(与胶条接触处)破... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 SDS-PAGE的主要应用有哪些? SDS-PAGE原理蛋白质是两性电解质,在一定的pH条件下解离而带电荷。当溶液的pH大于蛋白质的等电点(pI)时,蛋白质本身带负电,在电场中将向正极移动;当溶液的p... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 cDNA文库构建详细步骤 cDNA文库的构建分为六个阶段:阶段1:反转录酶催化合成cDNA第一链1.在置于冰上的无菌微量离心管内混合下列试剂进行cDNA第一链的合成:poly(A)+RNA ... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 无菌操作的注意事项及常见问题 做不同的实验,操作上会有小小的不同,而且不可能每个动作都被描述,所以实验时必须注意自己的动作。通常要注意的就是每项操作时都要尽可能减少污染的可能性,所以动作要尽量减... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR-SSCP实验步骤 一.样品制备1.PCR扩增并检测。根据不同的引物挑选适合的退火温度进行PCR扩增。扩增产物用2-2.5%的琼脂糖胶跑水平电泳检测,上样量3-5ul。PCR产物为10... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 碱变性法提取质粒DNA 质粒DNA提取的方法很多,有碱变性法、羟基磷灰石柱层析法、溴化乙锭 – 氯化铯梯度超离心法等。本次实验是一种小量快速提取法。小量快速提取法也有多种,但基本原理和步骤... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何做好western-blot实验 1.样品质量。所抽取样品的蛋白含量,蛋白变性是否充分等等,还有,蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外,蛋白样品是否降解、目的蛋白是否... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 western-blot实验中ECL发光检测操作步骤 ECL Western特异发光检测试剂盒用于辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋白或核酸检测。下面以engreen的超敏型ECL发光液Enlight-Plus为例,说一... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 Use of Green Fluorescent Protein (GFP) to Study Cellular Dynamics: Constructing GFP-Tagged Motor Enz The green fluorescent protein (GFP) from the Pacific Northwest jellyfishAequorea v... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 Measurement of Geminin Activity in Xenopus Egg Extracts Geminin is an unstable protein that inhibits DNA replication by interfering with t... 05月03日 发表评论 阅读全文