生物知识 PCR-引物设计原则 PCR-引物设计原则1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 引物的稀释和使用 1. Oligo DNA是以OD260单位来计算的,这是指在1ml体积1cm光程标准比色皿中,260nm波长下吸光度为1A260的Oligo溶液定义为1 OD260... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 使用prime 5.0验证引物的方法 验证引物我们做实验,有时会用到别人已经用过的引物,但如何才能知道这个引物是否正确呢?我通常利用prime 5.0来验证引物。下面我用常用的内参GAPDH将验证过程介... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 引物设计软件Oligo使用方法介绍 作为目前最好、最专业的引物设计软件,Oligo的功能很强,在这里我们介绍它的一些主要功能,如:普通引物对的搜索、测序引物的设计、杂交探针的设计以及评估引物对质量等等... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR引物设计及相关软件使用 主要内容:背景PCR引物设计原则常用PCR引物设计软件Primer Premier 5.0 介绍Oligo 6.22 介绍在线Primer3 介绍一、PCR聚合酶链... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 引物设计常见问题与解答(一) 1. 引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 引物溶解稀释方法 在实验室进行分子克隆实验时,经常需要合成大量的引物,而这些合成的引物首先要进行适当的稀释才能使用。如果不稀释就使用引物,往往造成引物的浪费和过早的活性丧失,更有一些... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 寡聚核苷酸引物的选择 1、简介寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 引物 一 设计引物应遵循以下原则1 、引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。2 、引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何设计引物(一) Primers:i) Oligonucleotide primers are generally supplied as "so many OD unit... 05月10日 发表评论 阅读全文