引物设计原则一：1. 引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA聚合酶进行...
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RT中Olig（dT）15引物与随机引物？
RT实验Olig（dT）15引物合成的条带明显优于随机引物，不是随机引物的效果较好吗？怎样解释这种现象网友一回答：Olig（dT）适合于长链甚至全长mRNA的RT，...
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四步法消除SYBR Green Ⅰ实时定量RT2PCR中引物二聚体
张驰宇1 ,2) , 张高红1 ,2) , 杨 敏1) , 贲昆龙1) 3 (1) 中国科学院昆明动物研究所分子与细胞免疫学实验室,昆明 650223 ;2)...
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PCR引物设计的原则与要点
DNA 聚合反应(即错配)。 引物设计应注意如下要点： 1 引物的长度一般为15-30 bp，常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于...
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增加PCR特异性：引物设计、退火温度、递减PCR、引物浓度纯度和稳定性、热启动
1、引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导...
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随机引物PCR技术
聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction）简称PCR，它是一种DNA体外扩增技术。1985年美国的Mullis等人发明了PCR技术，在体外...
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引物合成介绍及常见问题
目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产，无论采用什么机器合成，合成的原理都相同，主要差别在于合成产率的高低...
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RT-PCR引物的选择
随机引物适用于长的或具有发卡结构的RNA.适用于rRNA、mRNA、tRNA 等所有RNA的反转录反应。主要用于单一模板的RT-PCR反应。Oligo dT适用于具...
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Primer 3 在线引物设计攻略
开始之前：其实非常简单，不需要你下载任何软件，但是你得有一台电脑能上网。当然，最重要的是，你要很清楚用于做引物的模板序列，至于怎么找模板序列，不再本次讨论范围。另外...
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primer5和Oligo结合设计引物步骤及心得
一、引物设计step by step1、在NCBI上搜索到目的基因，找到该基因的mRNA，在CDS选项中，找到编码区所在位置，在下面的origin中，Copy该编码...
