生物知识 基于 PCR 的 DNA 文库筛选实验方法 材料与仪器PCR 混合物 PCR 引物寡核苷酸 杂交寡核苷酸 PCR 正对照 PCR 主要混合物 蒸馏水琼脂糖凝胶电泳设备步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂蒸馏水... 04月16日 发表评论 阅读全文
生物知识 用 PCR 来制备编码随机肽的双链 DNA 文库实验 材料与仪器限制性内切酶和缓冲液 灭菌双蒸水 Tris-HCl 生物素标记的 PCR 引物链霉抗生物素蛋白磁性珠 琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备步骤一、材料1. 缓冲... 04月15日 发表评论 阅读全文
生物知识 用 PCR 对一个随机多肽 DNA 文库的质量进行控制实验 材料与仪器ddH20 Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 引物 质粒 DNA琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备 热循环仪步骤一、材料1. 缓冲液、溶液... 04月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 消减 cDNA 或基因组 DNA 文库的制备实验 材料与仪器缓冲液、溶液和试剂 酶和酶缓冲液 核酸和寡核苷酸 放射性化合物 酚热循环仪 水浴箱 琼脂糖凝胶电泳所需的试剂与设备步骤第1阶段:RNA和DNA的分离一次双... 04月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 二代测序确定 sgRNA 文库的 sgRNA 分布 简介插入缺失率可以用 SURVEYOR 核峻酶测定法或新一代测序技术测定,新一代测序技术更适合对大量 sgRNA 作用杷标位置进行采样。材料与仪器器材:Illumi... 04月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 设计自定义的sgRNA文库 简介尽管每个 sgRNA 文库都是为特定目的而计算设计的,但基本的设计过程在文库之间是一致的。首先,根据已知的 sgRNA 靶向规则(如保守外显子 5' ... 04月10日 发表评论 阅读全文