生物知识 构建无需限制性内切酶和连接酶的cDNA文库 CloneMiner™ cDNA文库构建试剂盒(CloneMiner™ cDNA Library Construction Kit)使你... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA的提取及cDNa文库的构建 实验一,Total RNA的提取 1.试剂配制 准备工作: 1,研钵,5ml/10ml/ 25ml移液管,100ml/250ml量筒,250ml/100ml容量瓶,... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 构建全长cDNA文库:噬菌体文库和质粒文库注意事项 构建全长cDNA文库分为噬菌体文库和质粒文库,二者大同小异。无论怎样,应当注意如下几个方面: 一、保证获得数量足够的高质量的起始RNA。 构建cDNA文库要求的RN... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 各家cDNA文库构建试剂盒优缺点比较 Invitrogen的: 采用的是Gateway技术:利用λ噬菌体位点特异重组系统的BP和LR双向反应,首先将PCR产物用传统方法克隆到Gat... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 cDNA文库组标准流程 第一部分 Total RNA 的提取一、 试剂配制准备工作:1、研钵、5ml/10ml/ 25ml移液管、100ml/250ml量筒、250ml/100ml容量瓶、... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 miRNA定量及均一化cDNA文库技术 miRNA定量进行一次逆转录即可实现所有目标miRNA的测定?没错,采用加尾法,一次逆转录就可以得到全部miRNA对应的cDNA。我们知道,真核生物mRNA都是有p... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 编码 DNA 结合蛋白的 cDNA 克隆的检测、纯化和鉴定-用位点识别DNA筛选λgtll表达文库 材料与仪器含有多个串联拷贝识别位点的、缺乏识别位点的(或含识别位点突变的)pUC重组质粒DNA限制性内切核酸酶EcoRI及HhdIII 1 mol L Tris •... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 cDNA文库构建详细步骤 cDNA文库的构建分为六个阶段:阶段1:反转录酶催化合成cDNA第一链1.在置于冰上的无菌微量离心管内混合下列试剂进行cDNA第一链的合成:poly(A)+RNA ... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 用 PCR 控制基因组 DNA 文库的质量实验 材料与仪器ddH20 Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 质粒 DNA PCR 引物琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备 热循环仪步骤一、材料1. 缓冲... 04月17日 发表评论 阅读全文
生物知识 克隆自定义 sgRNA 文库 简介在整个 sgRNA 文库克隆和扩增过程中,要尽量减少任何可能影响筛选结果的潜在偏差。材料与仪器器材:Axygen 八连排 PCR 管、Axygen PCR 96... 04月16日 发表评论 阅读全文