生物知识 通过RNAi使基因特异性沉默 RNA interference (RNAi) is a phenomenon in which the introduction of double-strand... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 甲基化特异性PCR(MSP) 1. MSP原理:MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因组DNA,未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 甲基化特异性PCR全程易出现的问题与控制措施 亚硫酸氢钠修饰DNA的目的是将DNA序列中未甲基化的胞嘧啶完全转化为尿嘧啶,而甲基化的5一甲基胞嘧啶保持不变。影响此过程的主要因素有修饰试剂的浓度、反应温度、反应环... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 增加PCR特异性:引物设计、退火温度、递减PCR、引物浓度纯度和稳定性、热启动 1、引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 增加PCR的特异性:primers design 、stability of primers 、termperature 1. primers design 这是最重要的一步。理想的,只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的一些条件 a. 足够长18-24bp,以保... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 增加RT-PCR特异性的办法 第一链 cDNA合成的起始可以使用三种不同的方法,各种方法的相对特异性影响了所合成cDNA的量和种类。随机引物法是三种方法中特异性最低的。引物在整个转录本的多个位点... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 提高RT-PCR特异性的方法总结 第一链cDNA合成的起始可以使用三种不同的方法,各种方法的相对特异性影响了所合成cDNA的量和种类。引物种类对特异性的影响随机引物法是三种方法中特异性最低的。引物在... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何增加PCR特异性 引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 增加PCR特异性的八个方面 1、引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 提高PCR特异性的方法 1、引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导... 05月10日 发表评论 阅读全文