生物知识 S1分析酵母基因寡核苷酸探针 一、操作步骤 1. 在0.5 mL Eppendorf管中混合以下: 10-20 ug 酵母RNA 10 ul 杂交组合 加水,使终体积25 ul 40... 05月12日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA原位杂交中的探针种类 RNA探针是指带有标记的能与组织内相对应的核苷酸序列互补结合的一段单链cDNA或cRNA分子。根据在RNA杂交中所使用的探针依其来源可分为三种:即特异性cDNA,c... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 RNA探针的合成方法和合成效率检测 在RNA的杂交检测实验中,应用标记的RNA 探针将获得高灵敏度的杂交检测结果,与DNA 探针相比,检测灵敏度提高10-100倍。因为对于不同的杂交体类型来说,RNA... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学 一、DNA探针的应用 虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针,但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRN... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 Northern杂交试验指导手册-为制备RNA探针模板的DNA片断亚克隆 A. 载体选择 为了获得能够在体外转录RNA探针的DNA模板,其克隆载体必须带有可供选择的特异转录启动子,同时,为了获得理想的Northern杂交试验结果,载体选择... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PROBE PREPARATION(探针制备) Please make sure to reference Andrew Hamilton for this protocolProbes : I use sing... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 Northern杂交试验指导手册-RNA探针制备 五、RNA探针制备(根据the DIG system user's guide) A. 地高辛标记的体外转录 试剂及其配制(试剂盒提供): 10× NTP... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 地高辛标记cRNA探针实验方法 1.组织前处理在组织制片中以冷冻切片(厚10~30μm)最佳。切片贴在预先清洁,高温处理并涂以粘附剂载玻片上,先在37℃预干燥4h,然后置于37℃烤箱中过夜。经过上... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 核酸探针标记及原位杂交 一、核酸探针标记核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下(适宜的温度及离子强度等)可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 real time PCRTaqman探针设计、实时多重PCR探针的选择、引物的设计及评价 一、实时荧光Taqman 探针设计总原则:探针选择要保守,引物选择要保守,因此必须找一段100-200bp相对要保守的片段来设计引物与探针。即real-time P... 05月11日 发表评论 阅读全文