蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心.双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.coli 蛋白,并表明蛋白质谱不是稳定的...

非变性2D-PAGE:两向均在非变性条件下进行,这样分离的蛋白质点的等电点和表观分子 量同生理条件下获得的这些蛋白的值是一样的;非变性/SDS-2D-PAGE:第一...

一、 实验原理：2-DE的第一向电泳等电聚焦是基于等电点不同而将蛋白粗步分离，第二向SDS-PAGE是基于蛋白质分子量不同，而将一向分离后的蛋白进一步分离。这样就可...

一、第一向等电聚焦1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT，不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管)，置室温溶解。2. 在小管中加入0....

样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步，将直接影响 2-DE 结果好坏。目前并 没有一个通用的样品制备方法，尽管处理方法多种多样，但都遵循几个基本的原则：1....

水化上样( 被动上样)1. 从冰箱中取出 IPG 胶条，室温放置 10min。2. 沿水化盘槽的边缘从左向右线性加入样品，槽两端各 1cm 左右不加样，中间的样品液...

麻省理工学院(MIT)新型分子 筛(molecular sieve)能够加速对蛋白的精确分类，有望协助疾病的检测和治疗。分析复杂生物溶液，如血液中的蛋白对于研究患病...

1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子 量差异建立了IEF/SD S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳(管柱状)为第...

1. 总的策略① 化学试剂纯度要高，至少是分析级，目前国产试剂达不到纯度要求 ② 使用去离子水(电导<2uS) ③ 尿素和丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺需新鲜配制 ④...

1. 用 PDQuest软件 或肉眼比对，找出感兴趣的蛋白点，并做好标记和记录。2. 用 MilliQ水冲洗胶 2 次。3. 用色谱纯甲醇和 MilliQ水冲洗 E...