生物知识 亲和层析过程中的注意事项 1.上样亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 金属螯合亲和层析分离蛋白质 【实验目的】1.学习亲和层析的原理。2.掌握亲和层析法分离蛋白质的技术与操作。【实验原理】亲和层析是以普通凝胶作载体,连接上金属离子制成螯合吸附剂,用于分离纯化蛋白... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析技术 (一)原理亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析法纯化蛋白实验中需要注意的事项 蛋白纯化技术专题1.上样亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱 一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,包括上样流速、缓冲液种类、p... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 最新融合表达的亲和纯化小标签StrepTaq 在重组蛋白纯化的过程中,研究者常常利用融合表达的各种亲和标签,通过一步法亲和纯化的方法获得自己的目的蛋白。其中,6×His•Tag标签因其氨基酸个数少、对蛋白活性影... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析纯化胰酶 一、实验目的与原理 生物大分子化合物的重要特征之一是具有与某些相对应的分子通过次级键或共价键专一结合的能力即亲和力。例如酶与抑制剂之间,抗原与抗体之间,结合的双方不... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 蛋白质组学同位素标记的亲和标签方法 Aebersold和其合作者开发了一种同时对蛋白质组进行鉴定和相对定量的方法,即一种包含在无胶蛋白质组流程中的同位素标记技术(Gygi等,1999)。他们提出使用一... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 序列特异性 DNA 结合蛋白的亲和层析纯化实验-DNA亲和介质的制备 材料与仪器两种带有结合位点的合成寡核苷酸各440μgTE缓冲液 pH 7.8 10×T4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 20 mmol L ATP (钠盐) pH 7.0... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 序列特异性 DNA 结合蛋白的亲和层析纯化实验-DNA亲和层析法 材料与仪器制备性的DNA亲和层析树脂缓冲液Z或其他柱缓冲液(如缓冲液Ze或TM) 配制时含不同的KCl浓度(从缓冲液 Z 0.1 mol L KCl 至缓冲液 Z ... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 标记亲和素生物素法 (BA-ELISA) 实验-检测未知抗体 原理包被抗原:用0.05 mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液将已知的抗原作适当稀释,于聚苯乙烯酶标板的孔中加0.1 ml,于4 ℃放置18~24 h。用洗涤缓冲液洗... 05月07日 发表评论 阅读全文