生物知识 凝胶柱的清洗问题 问:最近在回收凝胶柱时(用的是镍柱),经过多次的洗脱液继续平衡清洗,发现还有一些很难去除的杂蛋白,不知应该用什么方法把这些难除的杂蛋白去除?答:一般用6M盐酸胍+0... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 几种分子筛凝胶及应用 做纯化的人可能经常接触到sephadex,BIO-Gel,sephacryl s-,sepharose BIo-Gel等几种填料,有时会混淆在一起,看到一个贴子较好... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白大小与纯度的鉴定 原理聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(Acrylamide简称Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(N,Nˊ-MethyleneBisacrylamide,简称Bis),在催化... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 一、试验目的了解并掌握垂直板凝胶电泳的使用方法。二、实验原理聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳是以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的一种区带电泳,由于此种凝胶具有分子筛的性质,所以本法... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 选择纯化凝胶的具体方法 生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性,然后通过实验选择出最有效的纯化... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 葡聚糖凝胶柱使用及注意事项 葡聚糖凝胶柱使用及注意事项1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用,Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。其既有分子筛作用... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 凝胶过滤原理 凝胶是一种多孔性的不带表面电荷的物质,当带有多种成分的样品溶液在凝胶内运动时,由于它们的分子量不同而表现出速度的快慢,在缓冲液洗脱时,分子量大的物质不能进入凝胶孔内... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 凝胶层析 凝胶层析又称为分子筛层析或凝胶过滤。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广,商品名是sephade... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 凝胶过滤的应用 1.生物大分子的纯化凝胶过滤是依据分子量的不同来进行分离的,由于它的这一分离特性,以及它具有简单、方便、不改变样品生物学活性等优点,使得凝胶过滤成为分离纯化生物大分... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 凝胶层析的优缺点 1.凝胶层析操作简便,所需设备简单。有时只要有一根层析柱便可进行工作。分离介质—凝胶完全不需要像离子交换剂那样复杂的再生过程便可重复使用。2.分离效果较好,重复性高... 05月08日 发表评论 阅读全文