我做了很久的western blot，尤其是phospho-抗体，可以算是达人了。我根据自己的经验，对磷酸化蛋白之western blot提出以下建议，供刚入门的同...
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磷酸化蛋白 WB 做不好？文献指出了你可能忽略的重要原因
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！这是因为处于不同的细胞生长状况和 / 或特定的细胞周期时，磷酸化蛋白可能仅占...
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磷酸化蛋白的western blot之建议
1. 一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂，还要加入一定量的磷酸酶抑制剂，否则即使band压出来也会很浅，结果也不可信。2. 加一抗后最好4℃过夜，保...
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检测蛋白磷酸化的六种方法及其优缺点
磷酸化评估蛋白激酶将磷酸基团从ATP转移到蛋白多肽底物上的丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基，直接影响目标的活性和功能。放射性研究表明，真核细胞中大约30%的蛋白经过磷酸化...
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磷酸化蛋白的免疫印迹检测经验总结
磷酸化蛋白的Western Blotting检测是信号通路研究中的经典方法。然而，有时会遇到一些问题，例如，磷酸化抗体检测不到总蛋白，不知道如何使用lysis bu...
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运用肽库筛选磷酸化激酶motif方法 Screening Kinase Phosphorylation Motifs Using Peptide Libraries
Screening Kinase Phosphorylation Motifs Using Peptide LibrariesIsaac A. Manke and ...
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大鼠磷酸化蛋白激酶C（P-PKC）酶联免疫分析
大鼠磷酸化蛋白激酶C （P-PKC ）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆，细胞上清及相关液体样本中磷酸化蛋白激酶C...
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利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化实验
材料与仪器异丙基 β-D-硫代半乳糖苷非变性裂解液 非变性洗涤液 非变性洗脱液 苯甲基磺酰氟超声匀浆器 聚丙烯柱步骤3.1 非变性条件下重组激酶的纯化用于磷酸化筛选...
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磷酸化蛋白鉴定实验
材料与仪器测序级膜蛋白酶二硫苏糖醇 碘代乙酰胺 乙酸溶液 甲酸 乙酰氯螯合琼脂糖凝胶层析介质步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的...
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western blot 检测蛋白激酶磷酸化水平
简介蛋白质磷酸化属于蛋白质翻译后修饰，是细胞信号转导过程中常见的一种修饰方式，常常用来调节蛋白的活性、构象和相互作用等生物学功能。真核生物中常见的磷酸化发生于丝氨酸...
