生物知识 PCR基因扩增原理及方法步骤 实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR扩增样本DNA的HLA基因片段 一、PCR扩增体系1. 1.0 uM 引物2. 300 ng 待测样本基因组DNA3. 2.0 U Taq多聚酶4. 200 uM 各种dNTP5. 用1×PCR缓... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 基因的PCR扩增(聚合酶链式反应) 实验原理 单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下,可以利用DNA聚合酶按5’→3’方向复制出互补DNA。这时单链DNA称为模板DNA,寡聚核苷酸片段称为引物(Pri... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 以反向PCR扩增抗人宫颈癌单克隆抗体重链可变区基因 单克隆抗体(mAb) V 区cDNA 序列的克隆是构建单链抗体(ScFv) 的关键一步[1 ] 。通常是在抗体V 区序列两头5′和3&... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR基因扩增及扩增产物的回收 为了获得大量的AKP基因,我们需要将目的基因通过PCR扩增基因剂量,方便下一步实验作基因重组。我们需要注意PCR产物的准确性和产率。特别注意引物、复性温度、TaqE... 05月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR在突变基因检测中的应用 分子生物学在医学领域中的应用越来越广泛,基因突变在肿瘤和遗传病的发生过程中的作用也日益受到重视,因此检测与遗传病及恶 性肿瘤发生有关的突变基因(mutant gen... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 RT-PCR在基因表达检测中的应用 RT-PCR检测基因表达的问题讨论 关于RT-PCR技术方法的描述参见PCR技术应用进展, 在此主要讨论它在应用中的问题。理论上1μL细胞质总RNA对... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 查尔酮合成酶基因的克隆 一、实验目的与意义 学习PCR操作技术,利用基因全长引物,扩增出查尔酮合成酶基因的全长,使学生掌握PCR的基本原理和操作。 二、实验原理 聚合酶链反应(Polyme... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR 条件对扩增SARS – CoV 多聚酶部分基因的影响 摘要:目的:对该实验室已建立的检测SARS 冠状病毒多聚酶基因的套式RT - PCR 方法进行优化。方法:从SARS 病人的嗽口水标本中提取RNA ,调整套式PCR... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 RT-PCR在基因表达(gene expression)检测中的应用 基因表达的检测方法基因表达的检测有几种方法。经典的方法(仍然重要)是根据在细胞或生物体中 所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一特定基因是否表达。随着大分子分离技... 05月10日 发表评论 阅读全文