酵母RNA的分离1）总酵母 RNA的分离1． 在每毫升培养物中加入 50 μ g 环乙酰亚胺，在 30 ℃下振荡 15 分钟。此步亦可省略，但是有人认为环乙酰亚胺可...
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酵母杂交实验的常见问题—试剂篇
问题一：经典转化试剂盒和Super转化试剂盒是否需要准备其它试剂？答：需要准备DMSO，无菌水或者无菌生理盐水，无需其它试剂。问题二：50%PEG3350溶液是否可...
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酵母杂交实验的常见问题—转化篇
问题一：菌种是否需要两次平板活化？答：根据菌种生长的具体情况。初始菌为1个月内活化过的酵母平板菌落，只需要进行一次平板活化；新鲜转化产物用于感受态制备，不需要平板活...
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酵母单杂交实验详细步骤
一、构建诱饵菌株1、制备YM4271感受态细胞2、取上述感受态菌液，与1μg pHisi-cor promoter质粒混匀后加入预冷为0.2cm（electrode...
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什么是酵母单杂实验？
酵母单杂交技术最早是1993年由Li等从酵母双杂交技术发展而来，通过对报告基因的表型检测，分析DNA与蛋白之间的相互作用，以研究真核细胞内的基因表达调控。由于酵母单...
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酵母双杂交常见问题及解决方法下
问题一：.酵母转化完成后可以用无菌水代替0.9%氯化钠溶液重悬菌体吗？可以的，生理盐水重悬的目的是为了维持渗透压，无菌水重悬酵母菌也可以，无菌水重悬后涂板和生理盐水...
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酵母双杂交常见问题及解决方法上
问题一：灭菌后酵母培养基颜色变成棕褐色怎么办？SD系列的培养基预混了葡萄糖，在灭菌过程中由于灭菌时间较长，或者灭菌后在高温条件下长时间放置，引起培养基中葡萄糖碳化，...
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酵母双杂实验注意事项
1、如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的，该怎么办？在某些情况下，在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1mL的SD/–Trp，接着将重...
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酵母双杂详细操作步骤
一、构建重组Activation Domain（AD）融合的重组质粒（pGADT7载体）以及Binding Domain（BD）融合的重组质粒（pGBKT7载体）；...
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什么是酵母双杂系统？
酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质分别克隆（融合）到酵母表达质粒的转录激活因子（如GAL4等）的DNA结合结构域（DNA-BD）和转录激活域（AD）上，构建成融合...
