一、材料与方法 1. EDTA（无蛋白酶抑制剂）（Roche） 2. 毛地黄皂苷（EMDChemicals） 3. 蛋白酶抑制剂（DMSO，leupeptin，pe...
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酵母双杂交实验常见问题
1.如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的，该怎么办？在某些情况下，在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp，接着将重...
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酵母双杂交实验操作步骤大全
酵母双杂交技术专题最近在做龙须菜高温胁迫表达cDNA文库的构建，选择的是CaM做诱饵质粒构建表达载体pGBKT-CaM，利用SMART技术将重组质粒转化到酵母菌 Y...
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酵母双杂交实验常见问题及其解决方法
酵母双杂交技术专题1.如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的，该怎么办?在某些情况下，在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆 于1ml的SD...
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甲醇酵母表达实验的注意若干事项
蛋白表达技术全攻略试验的注意事项1、信号肽识别位点的设计以质粒pPICZαA为例。在利用PCR反应在外源基因两端引入酶切位点的试验中。如果质粒p...
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Invitrogen公司的Pichia酵母表达系统使用总结
蛋白表达技术全攻略甲醇酵母表达系统有不少优点，其中以Invitrogen 公司的Pichia酵母表达系统最为人熟知，并广泛应用于外源蛋白的表达。虽然说酵母表达操作简...
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毕赤酵母蛋白不表达的原因
蛋白表达技术全攻略很多朋友问这样一个问题：为什么毕赤酵母不表达?他们自己也很纳闷，重组酵母PCR 检测也证明目的基因重组了，但是诱导之后就是在表达上清中检测不到目的...
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毕式酵母表达常见的问题及其解析
蛋白表达技术全攻略1、问：我用毕式酵母表达一个27KD的蛋白，小量表达并做SDS-PAGE有一条类似三聚体的条带。用大量表达，表达上清用镍柱进行亲和层析 ，在FPL...
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一种潜力无限的基因表达方法——甲醇酵母
蛋白表达技术全攻略&NBS p;你还在用E.col做基因表达 的研究吗?有点跟不上发展的脚步咯。新兴且发展迅速前途无限的甲醇酵母系统正越来越被人们熟知和看好...
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酵母实验操作方案
一．质粒 酶切及线性化1）用维特洁日常型小量DNA纯化试剂盒抽提9KSF2，可得到较纯的质粒10μg/3ml菌液，终体积80ul。 2）线性化质粒 使用80μl酶切...
