一、操作步骤 1. 在0.5 mL Eppendorf管中混合以下： 10-20 ug 酵母RNA 10 ul 杂交组合 加水，使终体积25 ul 40...
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DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学
一、DNA探针的应用 虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针，但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRN...
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PCR反应体系的寡聚核苷酸引物
一、引物设计的原则 1. 一般原则 （1）引物长度应在15~30 bp。其Tm=（G+C）×4+（A+T）×2，引物的有效长度Ln=2（G+C）+（A+T）；Ln&...
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寡聚核苷酸引物的选择
1、简介寡聚核苷酸引物的选择，通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的...
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序列特异性 DNA结合蛋白的亲和层析纯化实验-用制备性凝胶电泳纯化寡核苷酸
材料与仪器40% (m V) 19:1丙烯酰胺 双丙烯酰胺 16%聚丙烯酰胺凝胶 10×TBE缓冲液 尿素 10% (m V)过硫酸铵 TEMED 甲酰胺加样缓冲液...
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由酶循环确定烟酰胺核苷酸实验-NADP（H） 的测定
原理为了测定 NADP（H），可以采用谷氨酸脱氢酶（GluDH）和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH） 的偶联反应：在指定的条件下，一个 NADP 分子可以催化生成...
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由酶循环确定烟酰胺核苷酸实验-NAD（H）的测定
原理谷氨酸脱氢酶生成的 NAD＋在 LDH 催化下转化为 NADH，在第二步反应中形成的丙酮酸的测定可以通过 LDH 反应中添加 NADH。过量的 NADH 通过碱...
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在果蝇S2细胞中通过反义寡核苷酸抑制miRNA 功能
本方案描述了将ASO 转入果蝇S2 细胞以便抑制miRNA 功能的方法。通过检测miRNA靶蛋白水平或miRNA 靶基因3UTR 报道基因的活性，可以检测ASO 对...
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简并寡核苷酸引物 PCR
简介简并寡核苷酸引物 PCR，是用一条部分随机的引物对模板基因组 DNA 进行两步 PCR 扩增。原理简并寡核苷酸引物 PCR 的基本原理是 DOP-PCR 用一条...
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用随机寡核苷酸引物从mRNA合成cDNA探针
原理本方案以 poly(A)+RNA 作为模板，通过随机引物反应合成 cDNA 探针，这类探针可用于 cDNA 文库的差异筛选。材料与仪器反转录酶 反转录酶缓冲液 ...
