生物知识 包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性 蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。 可以参考以下文章。该文出处已经忘了,如果有人知道原创作者或网上出处,请补充。 包涵体表... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 编码 DNA 结合蛋白的 cDNA 克隆的检测、纯化和鉴定-用盐酸胍进行干燥膜的变性/复性循环 材料与仪器HEPES结合缓冲液步骤1)按基本方案步骤1〜15进行。2)将平皿在4℃冷却10 min。用针扎孔标记各膜的位置。小心地揭起膜,室温下在空气中瞭干15 m... 05月07日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何对包涵体蛋白进行表达与复性 包涵体即在某些生长条件下,在重组蛋白的表达过程中缺乏某些蛋白质折叠的辅助因子或环境不适,无法形成正确的次级键等原因形成的。表达量越高越容易形成包涵体。原因可能是合成... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 蛋白复性(三)-蛋白质的结构转换 摘要 许多不相关的蛋白质含有相同的短肽序列却形成不同的空间构象. 结构转换广泛存在于蛋白质折叠和功能过程中, 具有重要的生物学意义. 综述了Serpin和EF-T... 04月15日 发表评论 阅读全文
生物知识 蛋白复性(二)-基因重组蛋白质的体外复性 摘要 基因重组蛋白在大肠杆菌中表达时,由于表达量高,往往形成无生物活性的包涵体。包涵体必须经过变性和复性的过程才能获得有活性的重组蛋白。如何提高基因重组蛋白质的复性... 04月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 蛋白复性(一)-综述:包涵体表达的蛋白的复性 摘要 综述了包涵体形成、包涵体分离和溶解、包涵体折叠复性的方法、复性产率低下的主要因素以及通过分子伴侣、低分子量添加物等的应用而提高了蛋白质复性产率。关键词 包涵体... 04月11日 发表评论 阅读全文
生物知识 重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量 重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量按Qiagen公司的操作手册进行,具体步骤如下。一、重组蛋白质的诱导表达1.挑取转化有质粒的单菌落,接种于3ml 选择性LB液体培... 04月10日 发表评论 阅读全文