生物知识 引物设计常见问题与解答(一) 1. 引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR常见问题分析及对策(无扩增产物、非特异性扩增、拖尾、假阳性) 问题1:无扩增产物现象:正对照有条带,而样品则无原因:1、模板:含有抑制物,含量低2、Buffer对样品不合适3、引物设计不当或者发生降解4、反应条件:退火温度太高... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR常见问题分析及解决方案 PCR技术的发明1983 Kary Mullis 发明1985 开始有文章发表1993 获诺贝尔奖广泛用于分子生物学研究领域变性--退火--延伸三个步骤1、模板DN... 05月10日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR常见问题集锦 PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带:PCR反应的关键环节有:①模板核酸的制备,... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR常见问题总汇 1、PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。2、假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有:①模板核酸的... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR常见问题总结 PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR和RT-PCR常见问题及解答 问 题可能原因建议解决方法RT-PCR 灵敏度:在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR 产物RNA 被降解在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA 使用良好... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR技术(五):常见问题分析与对策 PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 PCR技术系列五:常见问题分析与对策 PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 Native-PAGE常见问题 1. 非变性聚丙烯酰胺 凝胶电泳 时预电泳是怎么回事的?预电泳时要加6×DNA上样缓冲液吗?电泳1-2小时再加结合反应产物吗?预电泳是除去凝胶中没有聚合的单体和双体... 05月09日 发表评论 阅读全文