生物知识 金属螯合亲和层析分离蛋白质 【实验目的】1.学习亲和层析的原理。2.掌握亲和层析法分离蛋白质的技术与操作。【实验原理】亲和层析是以普通凝胶作载体,连接上金属离子制成螯合吸附剂,用于分离纯化蛋白... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析技术 (一)原理亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 凝胶层析法脱盐和分离蛋白质 (一)原理凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为“脱盐”(desalthing)。脱... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 纸层析法:分离鉴定氨基酸实验 纸层析法是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。本文主要介绍了纸层析法分离鉴定氨基酸的实验原理、器材和具体操作步... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析法纯化蛋白实验中需要注意的事项 蛋白纯化技术专题1.上样亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱 一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,包括上样流速、缓冲液种类、p... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 凝胶层析法蛋白质脱盐 一、原理:含盐蛋白质溶液流经凝胶层析柱 时,低相对分子 量的盐分子 因浸入凝胶颗粒的微孔中,所以向下移动的速度较慢;而大分子的蛋白质不能进入凝胶颗粒的微孔,以较快的... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 葡聚糖凝胶柱层析纯化PPO粗酶液 一、原理1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 离子交换柱层析法分离可溶性蛋白的操作规范 通常,可溶性蛋白可通过离心、盐析、电泳和层析来分离。本文介绍可溶性蛋白离子交换柱层析 操作规程:包括了装柱、柱的平衡与上样、洗杂蛋白、解离目的蛋白以及柱的清洗与保存... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析纯化胰酶 一、实验目的与原理 生物大分子化合物的重要特征之一是具有与某些相对应的分子通过次级键或共价键专一结合的能力即亲和力。例如酶与抑制剂之间,抗原与抗体之间,结合的双方不... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 序列特异性 DNA 结合蛋白的亲和层析纯化实验-DNA亲和介质的制备 材料与仪器两种带有结合位点的合成寡核苷酸各440μgTE缓冲液 pH 7.8 10×T4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 20 mmol L ATP (钠盐) pH 7.0... 05月07日 发表评论 阅读全文