生物知识 蛋白质纯化亲和层析法 若表达蛋白质上含有一段六个His 的片段,而亲和吸附胶上接有镍离子,此蛋白质会特异性地结合到吸着胶体;洗去杂质后可imidazole 洗脱目标蛋白质。(Pharma... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析的应用 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。1.抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析实验方法-溴化氰活化 亲和层析的实验操作和一般柱层析类似,都包括:装柱、上样、洗脱、样品收集、结果处理等步骤。溴化氰活化琼脂糖用于配体固相化是实验室亲和层析最常用的技术之一,该方法简便廉... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析技术研究进展 亲和层析(Affinity Chromatography,AC)是利用偶联亲和配基的亲和吸附介质为固定相亲和吸附目标产物,使目标产物得到分离纯化的液相层析法。亲和层... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 凝胶层析 凝胶层析又称为分子筛层析或凝胶过滤。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广,商品名是sephade... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 离子交换层析 简介离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 关于柱层析的实验方法和技巧 常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 His-Tag重组蛋白亲和层析标准操作规程(SOP) 材料琼脂糖凝胶介质镍亲和柱紫外检测仪蛋白电泳装置及夹子、玻璃板、灌胶支架、缓冲液槽等附件5 ml 注射器0.45 μm 滤器超声破碎仪试剂1. 结合缓冲液:20 m... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 亲和层析过程中的注意事项 1.上样亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短,通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件,包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 凝胶层析的优缺点 1.凝胶层析操作简便,所需设备简单。有时只要有一根层析柱便可进行工作。分离介质—凝胶完全不需要像离子交换剂那样复杂的再生过程便可重复使用。2.分离效果较好,重复性高... 05月08日 发表评论 阅读全文