生物知识 哪种RNA转染试剂效果更好? Turbofect or EntransterTM-R4000? 近期,上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofect transfection reagent(Thermo)和 EntransterTM-R4... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 质粒DNA转染注意事项 1.启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。2.质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 请问共转染的两种质粒需要选择不同载体吗 在基因转染实验中,共转染的两种质粒通常不一定需要选择不同的载体,但有一些情况下选择不同的载体可能会更有优势:同源重组和重复序列问题:如果两个质粒使用相同的载体序列,... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 质粒DNA转染实验效率影响因素 1,质粒的构建:启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。2, 质粒的大小和质量线性... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 细胞生长速度非常快,现在在密度20-30%时就开始转染,但是到了60小时后细胞密度已经非常高,几乎没有空隙。如果继续等待,是否会导致细胞状态不佳,从而影响到实验中蛋白的表达效果。 细胞密度确实会影响转染效率和蛋白表达。如果细胞密度过高,可能会导致以下问题:营养和废物积累:高密度会导致培养基中的营养迅速消耗,废物积累增加,这会影响细胞的健康状态... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 siRNA转染常见问题及解决方案 1. RNA与转染试剂比例不佳由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。R... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 shRNA转染实验步骤 下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下shRNA转染步骤(24孔板)1.提前1天细胞种植贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 做好RNA转染的几点建议 1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 都说RNAi很容易降解,转染效率很低,是真的吗? RNAi就是利用降解双链RNA的酶系统,人工引入一段和目标RNA互补的序列,这样,在细胞内形成双链RNA,诱发降解机制,使目标RNA降解,无法被进一步翻译。在转染过... 05月03日 发表评论 阅读全文
生物知识 如何优化RNA转染条件? 可从以下几方面进行优化:1.纯化RNA在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核... 05月03日 发表评论 阅读全文